Michael Scofield : Wentworth Miller Le frère de Lincoln se fait incarcérer dans l'espoir de sortir son frère de prison. Il s'est ainsi fait tatouer un plan de la prison sur le corps pour pouvoir en sortir. Il ne s'attend pourtant pas aux difficultés qu'il va rencontrer sur son chemin, et notamment au problème posé par Bellick, le redoutable garde de la prison. Une fois dehors, ses soucis ne s'arrêtent pourtant pas : un agent du FBI, qui comprend parfaitement son mode de pensée, le traque sans relâche...
Lincoln Burrows : Dominic Purcell Emprisonné pour un crime qu'il n'a pas commis, Lincoln s'est résolu à être exécuté lorsque son frère lui apprend qu'il est venu pour le faire évader. D'abord réticent à cette idée, il y adhère lorsque son fils LJ lui déclare que sa mère et son beau-père se sont fait tuer par des agents secrets. Il aide ainsi Michael dans son projet, et une fois sorti de prison, tente avec lui de se mettre en sécurité. Pas facile avec les autorités à ses trousses !
Veronica Donovan :Robin Tunney John Abruzzi :Peter Stormare Fernando Sucre :Amaury Nolasco Le compagnon de cellule de Michael s'est fait emprisonner après avoir dévalisé une épicerie pour offrir une bague de fiançailles à sa petite amie. Il accepte de prêter main forte à son ami après avoir appris le futur mariage de cette dernière, enceinte de lui, avec son cousin Hector, celui-là même qui l'avait dénoncé. Evadé de Fox River, il n'a de cesse de retrouver celle qu'il aime !
Brad Bellick : Wade Williams Gardien à Fox River, Bellick arrondi ses fins de mois en rackettant les prisonniers. Son coeur de pierre et ses muscles le font craindre de ces derniers, mais il finit par se faire renvoyer après la révélation de ses malversations. Il reprend espoir en décidant de retrouver les fugitifs pour toucher la récompense. Apprenant que Michael et son frère sont à la recherche de plusieurs millions de dollars, il décide de les doubler sur le coup.
Agent Paul Kellerman Paul Adelstein Dr Sara Tancredi : Sarah Wayne Callies Docteur à la prison de Fox River, Sara est une ancienne toxicomane qui tente de chasser ses démons en soignant les détenus. Elle tombe amoureuse de Michael et joue un rôle clé dans son évasion, en laissant la porte de l'infirmerie ouverte. Rongée par la culpabilité et accablée par la mort de son père, elle replonge dans la drogue. Aux Alcooliques Anonymes, elle trouve un soutien inattendu auprès de Kellerman, ignorant sa véritable identité et ses intentions...
Lincoln 'L.J.' Burrows Jr : Marshall Allman Theodore "T-Bag" Bagwell : Robert Knepper Pédophile et violeur, T-Bag est cruel et sans pitié. Il force les autres prisonniers à l'inclure dans leur plan d'évasion, mais ne fait que compliquer les choses. Lors de l'évasion, John Abruzzi n'hésite pas à lui couper la main pour le séparer des menottes qui le lient à Michael. Apprenant l'existence des millions de dollars cachés par Westmoreland, il tente à son tour de rechercher le magot...
Benjamin "C-Note" Miles: Franklin Rockmond Dunbar Ancien soldat, C-Note est en prison pour avoir transporté des marchandises volées, mais sa famille le pense toujours en Irak. Les siens ayant besoin de lui, il décide de se joindre au projet d'évasion de Scofield. Mais une fois dehors, son épouse est informée qu'il est recherché par les autorités, et qu'il était donc en prison. C-Note n'a de cesse de trouver un moyen de s'enfuit avec sa femme et sa fille. Mais sa famille est sous surveillance...
Agent Alexander Mahone : William Fichtner Agent du FBI, Mahone est un personnage obscur dont les intentions sont troubles. Sur les traces des fugitifs de Fox River, il traque sans relâche les détenus, quitte à employer des méthodes plutôt radicales.
Norman "Lechero" St. John : Robert Wisdom
James Whistler: Chris Vance Susan B. Anthony: Jodi Lyn O'Keefe
Sofia Lugo :Danay Garcia